富道細(xì)胞跟大家分享了細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞為什么要貼壁的原因,那如果我們?cè)谑褂眉?xì)胞工廠培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞貼壁不理想的情況下,也不需要太著急,我們可以從以下幾個(gè)方面來(lái)分析細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞不貼壁的原因:
細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間:消化不夠細(xì)胞本身就是成團(tuán)的;若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞膜蛋白損傷,使細(xì)胞不能貼壁在細(xì)胞工廠內(nèi),顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。
細(xì)胞缺少貼壁因子:血清中含有促貼壁因子,而無(wú)血清培養(yǎng)基工藝中由于缺少這種促貼壁因子,細(xì)胞在細(xì)胞工廠內(nèi)的貼壁效果會(huì)下降很多。
支原體或細(xì)菌的污染。培養(yǎng)液配置、儲(chǔ)存不當(dāng),如 pH 值過(guò)堿,Gln 量太少等原因。復(fù)蘇時(shí)處理速度太慢,復(fù)蘇過(guò)程不當(dāng)。接種細(xì)胞數(shù)目太少,無(wú)法分泌足夠的細(xì)胞外基質(zhì),也會(huì)影響細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞的貼壁性能或者就是在復(fù)蘇的細(xì)胞本身狀態(tài)不好,已經(jīng)老化,失去貼附性。
那我們?cè)诹私饬瞬毁N壁的各種原因之后我們就可以對(duì)癥下藥來(lái)改善細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞根據(jù)細(xì)胞種類來(lái)適當(dāng)來(lái)消化細(xì)胞,一般時(shí)間為5min,容易脫落的時(shí)間控制在2-3min即可,選用經(jīng)過(guò)表面改性處理的細(xì)胞工廠,找正規(guī)廠家。需要正確配制消化液或培養(yǎng)液。使用合適細(xì)胞工廠內(nèi)的細(xì)胞外基質(zhì)或貼壁試劑。復(fù)蘇新的細(xì)胞,第一周用 20% 血清幫助細(xì)胞復(fù)原。傳代接種一定要鋪的均勻,避免細(xì)胞抱團(tuán)生長(zhǎng)。細(xì)胞傳代 24 小時(shí)之內(nèi),最好不要晃動(dòng),以免影響細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞貼壁性。
這就是富道細(xì)胞為大家分享的細(xì)胞工廠內(nèi)細(xì)胞不貼壁怎么辦的原因和解決辦法,希望對(duì)大家有所幫助。