細胞工廠多用于大規(guī)模的細胞培養(yǎng)實驗中,在培養(yǎng)細胞的同時,我們需要監(jiān)控細胞的生長狀況,那么觀察細胞工廠培養(yǎng)效果的五個方面分別是:
1.細胞生長曲線:細胞生長曲線是細胞培養(yǎng)實驗中最基本的指標,是測定細胞絕對增長數(shù)值和生長繁殖基本規(guī)律常用的簡便方法。常用的方法為:在同一規(guī)格的培養(yǎng)瓶中,接種同等量的同一代細胞,經(jīng)培養(yǎng)后每隔24小時取出幾瓶細胞進行計數(shù),以培養(yǎng)時間為橫座標,不同時刻的細胞數(shù)的對數(shù)為底座標,標出各點并連成線,即為該細胞的生長曲線,可反應出細胞生長的動態(tài)。
2.細胞生長倍數(shù):是指測定接種時活細胞的濃度,經(jīng)一個生長周期達到最大活細胞濃度的比率。
3.細胞分裂指數(shù):是表示細胞增殖旺盛程度的指標。它以被測1000個細胞中的分裂細胞數(shù)來計算。其方法為:用秋水仙素將細胞處理1~2小時后,按染色體制片法制片并染色,計算1000個細胞中分裂相的數(shù)目,重復4次取平均值,用百分比表示。
4.細胞接種存活率:又稱細胞貼壁率。它是細胞被制成分散的懸液后,以低密度(2~5個細胞/cm2)被接種到細胞工廠中,貼壁并能存活生長形成細胞小群(克隆)的細胞百分數(shù)值,用以表示細胞的生存能力和細胞群的活力。
5.克隆形成率:克隆形成率反映細胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。由于細胞生物學性狀不同,細胞克隆形成率差別也很大,一般初代培養(yǎng)細胞克隆形成率弱,傳代細胞系強;二倍體細胞克隆形成率弱,轉化細胞系強;正常細胞克隆形成率弱,腫瘤細胞強。并且克隆形成率與接種密度有一定關系,做克隆形成率測定時,接種細胞一定要分散成單細胞懸液,直接接種在碟皿中,持續(xù)一周,隨時檢查,到細胞形成克隆時終止培養(yǎng)。
以上是衡量細胞工廠中細胞生長狀況的有關指標,通過這些指標可以判斷細胞在培養(yǎng)容器中的生長情況,以便及時發(fā)現(xiàn)情況,做出調整。
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