傳代培養(yǎng)是指需要將培養(yǎng)物分割成小的部分,重新接種到另外的培養(yǎng)器皿(瓶)內,再進行培養(yǎng)的過程。在貼壁細胞傳代過程中,血清移液管是非常重要的一種實驗室耗材。
當原代培養(yǎng)成功以后,隨著培養(yǎng)時間的延長和細胞不斷分裂,一則細胞之間相互接觸而發(fā)生接觸性抑制,生長速度減慢甚至停止;另一方面也會因營養(yǎng)物不足和代謝物積累而不利于生長或發(fā)生中毒。貼壁細胞是貼附在培養(yǎng)瓶的表面,依靠自身分泌或培養(yǎng)基中提供的貼附因子在表面生長、繁殖。
要進行細胞的傳代,首先要利用血清移液管將瓶內的培養(yǎng)液吸出,然后重新加入胰酶消化細胞。倒掉胰酶后,加入新鮮培養(yǎng)基,利用血清移液管反復吹打消化好的細胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基制成細胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋上瓶蓋,適度擰緊后再稍回轉,以利于CO?氣體的進入,將培養(yǎng)瓶放回CO?培養(yǎng)箱。
血清移液管在貼壁細胞的傳代中主要用于各種培養(yǎng)基、消化液、清洗液的吸取和加入,注意操作過程要保持無菌,如果是不同的細胞,不能用同一根管子,避免影響細胞后期生長。
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