細胞傳代是細胞培養(yǎng)中的常見操作,是指將細胞從一個培養(yǎng)容器轉移到新的培養(yǎng)容器,以促使細胞繼續(xù)增殖和生長。下面是細胞工廠中細胞傳代操作的一般步驟:
1.準備細胞培養(yǎng)物:取出細胞培養(yǎng)物,并檢查細胞的狀態(tài)和密度。確保細胞培養(yǎng)物在最佳生長狀態(tài)下,并評估細胞數(shù)量和健康程度。
2.預處理培養(yǎng)容器:選擇適當規(guī)格的細胞工廠,根據(jù)細胞數(shù)量和預計生長時間,添加適量的培養(yǎng)基或培養(yǎng)液。
3.潤洗細胞:將細胞培養(yǎng)物中的細胞用培養(yǎng)液潤洗,去除細胞培養(yǎng)物中的殘留物和廢液。通常使用無菌的緩沖液如PBS(磷酸鹽緩沖液)或無菌的細胞培養(yǎng)基進行潤洗。
4.細胞解離:加入適當?shù)募毎怆x酶、酶胺或溫和的緩沖液來解離細胞,以使其分散成單個細胞。時間和條件應根據(jù)具體細胞類型和解離試劑進行優(yōu)化。
5.計數(shù)細胞:使用細胞計數(shù)儀或倒數(shù)器,對解離的細胞進行計數(shù),以確定細胞的濃度和數(shù)量。根據(jù)需要計算和調整細胞的傳代比例。
6.接種新的培養(yǎng)容器:將適量的細胞加入預處理好的新細胞工廠中繼續(xù)培養(yǎng)。
以上是細胞工廠中細胞傳代的操作步驟,在操作的時候我們要嚴格地遵循無菌原則,因為細胞很容易因為操作不當而受到污染。當然,你也可以借助細胞工廠專用的管路系統(tǒng),降低細胞污染風險。
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